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2.7. Methoden für den mikrobiologischen Bereich

In dem untersuchten Sektionsgut konnte eine Reihe von Mikroorganismen

nachgewiesen werden. Vier dieser massen- und zahlenmäßig am

häufigsten in Herzblut und Leber bestimmten Spezies wurden nach ihrem

Häufigkeitskriterien ausgewählt, und für die späteren Versuche, bei denen

es um die Verstoffwechselung bzw. Abbau von Drogen durch

Mikroorganismen geht, verwendet.

Ausgewählt wurden: Pseudomonas putida, Serratia marcescens, E.coli und

Staphylococcus aureus.

Bis auf Staphylococcus aureus, ein Vertreter aus der Gruppe der gram

positiven Mikroorganismen, handelte es sich bei den anderen drei Vertreter

ausschließlich um gram negative Spezies, welche bis auf Pseudomonas

putida aus der Familie der Enterobacterien stammen.

Für die mikrobiellen Studien wurde für alle zu untersuchenden

Mikroorganismen ein gemeinsamer Nährbouillion gesucht. Als geeigneter

Nährboullion wurde hierbei der sogenannte Müller-Hinton-Bouillion

ausgewählt.

Zusammensetzung des Müller-Hinton-Bouillion II Broth:

Beef Extract 3,0g/l

Caseinhydrolysate 17,5g/l,

Stärke 1,5g/l.

Bei dem Müller-Hinton-Bouillion II Broth handelt es sich um einen

Nährbouillion, welcher aufgrund seiner geringen Viskosität und seines

breiten Nährstoffspektrums sowohl ein gutes Nährmedium als auch gute

Eigenschaften für die analytische Aufarbeitung liefert.

Der Nährboullion wird mit jeweils einem der ausgewählten Mikroorganismen

beimpft. Die Menge an zugegebenen Mikroorganismen wird mit einem

Densidometer eingestellt. Dabei wird abhängig von den eingesetzten

Mikroorganismen eine unterschiedliche optische Dichte gewählt. Zu der

Probe wird anschließend eine definierte Konzentration an Morphin-HCl,

Codein-Monohydrat, Levomethadon und sowie Morphin-3ß-D-Glucuronid

gegeben. Die verschiedenen Substanzen wurden als methanolische

Lösungen zugesetzt.

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